Analysis of the effect of hemolytic index on the detection results of uric acid by two different methods

Xie Guangsu¹.Liao Zedong²

（1. Xindu District People's Hospital of Chengdu, Sichuan Chengdu 610500  2.Chengdu Medical College,Sichuan Chengdu  610500）

[Abstract] Objective  To investigate the effect of hemolytic index on the detection of uric acid by Beckman AU5800 automatic biochemical analyzer and VITROS 5600 automatic biochemical immunoassay. Methods  Forty fresh healthy adult specimens of fat-free blood, hemolysis and jaundice were collected. Uric acid was detected by AU5800 automatic biochemical analyzer and VITROS 5600 automatic biochemical immunoassay, respectively. After artificial hemolysis, uric acid was detected again by two instruments. The effects of different hemolytic indexes on uric acid were analyzed. Results  AU5800 automatic biochemical analyzer and VITROS 5600 automatic biochemical correlation immunity analyzer uric acid test result is good, the difference was statistically significant, specimen hemolysis, two methods have shown results of uric acid is reduced, the hemolysis index < 200 mild-to-moderate hemolysis, automatic biochemical analyzer and VITROS 5600 bias is consistent, the hemolysis index > 200 severe hemolysis, VITROS 5600 dry chemistry analyzer uric acid detection bias for 6.50%, less than the traditional automatic biochemical analyzer - 9.64% of the bias. Conclusion  The bias of the hemolysis index on the uric acid detection results of the two different methods is not completely consistent. In the process of specimen collection and disposal, attention should be paid to prevent hemolysis, so as not to affect uric acid detection.

[keyword] Hemolytic index,Uric acid, Automatic biochemical analyzer，Automatic biochemical immunity analyzer

尿酸是人体内嘌呤类化合物分解代谢的最终产物，嘌呤代谢紊乱导致高尿酸血症（Hyperuricemia, HUA）。近年来，随着人们生活方式和饮食结构的改变，高尿酸血症的发病率逐年上升,并具有年轻化的发展趋势^[1,2]。高尿酸血症（HUA）是指正常嘌呤饮食状态下非同日的两次空腹血尿酸高于正常值上限，男性>416.4umol/L,女性>356.9umol/L^[3]。尿酸与痛风、高血压、冠心病、动脉硬化、慢性肾病等多种疾病有着密切关系，如长期的高尿酸血症易诱发痛风，血清尿酸定量检测对及时正确诊断痛风具有重要意义^[4]。在实际临床检验中，不同检测仪器、检测方法和标本的状态均影响血清尿酸检测的最终结果，影响临床对疾病的判断及治疗。因此，使不同检测系统对同一项目的检测具有可比性非常重要^[5]。全自动生化分析仪是目前实验室最传统、运用最广的检测方法，多用于大批量生化标本检测。VITROS 5600全自动生化免疫分析仪采用的干化学分析法因其无清洗管路、无交叉污染、24小时待机等多种优点常用于急诊检验。因方法学存在较大差异，部分生化检测项目在不同系统上没有可比性，给临床医生对疾病的判断带来严重困扰。本文通过分析贝克曼AU5800全自动生化分析仪和VITROS 5600全自动生化免疫分析仪尿酸检测结果一致性，并分析溶血指数对两种方法学尿酸检测的影响，判断溶血标本在不同的两种方法尿酸检测结果是否一致。

1. 材料与方法

1.1标本来源  随机选取我院体检的健康成人无脂血（脂血指数<20）、无溶血（溶血指数<15）、无黄疸（黄疸指数<2）的红头管促凝新鲜合格标本5ml，共40份。

1.2 仪器与试剂

1.2.1  仪器  贝克曼AU5800全自动生化分析仪，强生VITROS 5600全自动生化免疫分析仪

1.2.2  试剂  贝克曼库尔特试验系统（苏州）有限公司提供配套尿酸测定试剂盒、Beckman Coulter 系统校准品，美国伯乐公司提供生化复合质控品。美国强生公司提供VITROS 5600全自动生化免疫分析仪的全部配套试剂干片、配套校准品及质控品。

1.3  分析方法  首先对两台仪器进行质控检测，保证检测结果的准确性和重复性，质控在控后，对所有标本予以3000rbp/min离心15min，分离上层血清。分离血清后进行随机编号1-40号，1-20号先在贝克曼AU5800全自动生化分析仪检测尿酸（尿酸酶-过氧化物酶法），检测完毕后立即于VITROS 5600全自动生化免疫分析仪上检测尿酸（比色法）。21-40号先于VITROS 5600全自动生化免疫分析仪上检测尿酸，检测完毕后于贝克曼AU5800全自动生化分析仪检测。待40份正常标本全部检测完毕后，用手工方法进行溶血处理，溶血后予以3000rbp/min再次离心15min，按之前的方法再次在AU5800全自动生化分析仪和VITROS 5600全自动生化免疫分析仪上检测溶血后尿酸值，同时，读取VITROS 5600全自动生化免疫分析仪上的溶血指数。按照溶血指数（正常无溶血<15）将所有溶血标本分为三组A组（溶血指数为15-100），B组（溶血指数为101-199）和C组（溶血指数>200），分别统计分析各组和溶血前的尿酸检测值的偏倚。

1.4  统计学方法   采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，实验数据以均数±标准差（±s）表示，所有数据符合正态分布，组间两两比较采用配对t检验，偏倚分析采用单因素方差分析，P<0.05差异有统计学意义。

2.结果

2.1 AU5800全自动生化分析仪和VITROS 5600全自动生化免疫分析仪（干化学法）尿酸检测的结果均采用±s表示，测定结果见表1。

表1  AU5800全自动生化分析仪和VITROS 5600全自动生化免疫分析仪溶血前后尿酸检测结果（±s）

2.2 将各组进行配对t检验，检验结果见表2。

表2  AU5800全自动生化分析仪和VITROS 5600全自动生化免疫分析仪配对t检验结果分析

各组间相关系数均>0.975，AU5800全自动生化分析仪和VITROS 5600全自动生化免疫分析仪在检测尿酸的结果上相关性良好，但P均<0.05，差异有统计学意义。经人工溶血后，A组（溶血指数为15-100）共13例，B组（溶血指数为101-199）共12例，C组（溶血指数>200）共15例，计算溶血后尿酸在AU5800和VITROS 5600检测结果的偏倚。

偏倚（%）=（（溶血后尿酸检测结果-溶血前尿酸检测结果）/溶血前尿酸检测结果）*100%

2.3 计算的偏倚均值见表3。

表3  尿酸在不同溶血指数组检测结果的偏倚均值（%）

将两组数据的偏倚进行单因素方差分析，在AU5800组，A组和B组P值为0.353，P>0.05,差异无统计学意义，其余组间P<0.05,差异有统计学意义。在VITROS 5600干化学分析仪组，A组和B组P值为0.081，P>0.05,差异无统计学意义，其余组间P<0.05,差异有统计学意义。标本溶血后，在溶血指数<200的轻中度溶血中，全自动生化分析仪和VITROS 5600的偏倚较一致，在溶血指数>200的重度溶血中，VITROS 5600干化学分析仪尿酸检测的偏倚为-6.50%,要小于传统的全自动生化分析仪-9.64%的偏倚。

3.讨论

高尿酸血症作为痛风的重要生化基础，不同系统检测血清尿酸结果的一致性和抗干扰能力对于临床的诊治起着非常重要的作用。随着卫生事业的不断发展，各种不同的检测系统和检测方法应运而生，同一医院的同一检测项目有两个及以上的检测系统，而每个检测系统有各自不同的检测原理、方法、不同的校准溯源等，这些差异导致同一医院检测的同一项目没有可比性，给临床疾病的诊断带来一定困难^[6]。AU5800全自动生化分析仪代表的是传统的湿化学检测方法，可利用终点法、速率法、电极法等对标本进行分析，而VITROS 5600全自动生化免疫分析仪则代表的是近些年发展起来的干化学检测法^[7]。目前用于尿酸的检测方法有酶紫外法、酶比色法、磷钨酸比色法、干化学法等^[8]。

本文结果显示在AU5800全自动生化分析仪和VITROS 5600全自动生化免疫分析仪（干化学法）完全不同的两个检测系统检测的尿酸结果具有良好的相关性，但差异有统计学意义。血液标本在采集过程中会受到部分因素的影响，这些因素的存在可能会影响最终的生化检测结果^[9,10]。当标本溶血时，红细胞遭到破坏，红细胞的内容物如血红蛋白、各种酶类物质等释放到血清当中，导致一些生化物质的含量发生改变，从而影响生化检测结果。尿酸检测结果的偏倚随着溶血指数的增加而增加，在溶血指数小于200的轻中度溶血时，干化学和全自动生化分析仪检测的尿酸的偏倚比较一致，差异无统计学意义。当溶血指数>200时，VITROS 5600全自动生化免疫分析仪的偏倚明显小于全自动生化分析仪。因此，在重度溶血的患者（溶血指数>200），VITROS 5600全自动生化免疫分析仪检测的尿酸结果受到的干扰比AU5800全自动生化分析仪检测的结果更小，但本实验也存在标本量较少的问题。

综上所述，不同溶血指数对两种不同方法尿酸检测结果均为负影响，随着溶血指数的增加，影响增大。因此，在采血过程、后期血样处理、样本生化检测过程中有必要进行避免血样溶血的各种情况的处理，尽可能的保证检测结果的准确性^[11,12]。 

参考文献

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